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                      达沙替尼联合干扰素对Raji细胞增殖的作用及机制

                      谭大为  苏艳丽  郑丹  郑方  童晓丽  
                      【摘要】:目的 探讨达沙替尼联合干扰素对Raji细胞增殖的作用及其机制。方法 取人伯基特淋巴瘤(BL细胞Raji培养至对数生长期,采用0. 1、0. 5、1. 0、5. 0、10. 0及15. 0μmol/L达沙替尼分别作用12、24及48 h,采用细胞增殖检测(CCK8)法计算各浓度组不同时间的细胞抑制率和半抑制浓度(IC50)选择后续实验合适的达沙替尼浓度及作用时间;将对数生长期的Raji细胞孵育24 h分为空白对照组(不加达沙替尼和干扰素)、单用组(5. 0、10. 0及15. 0μmol/L达沙替尼)及联用组(5. 0、10. 0及15. 0μmol/L达沙替尼分别联合5×106U/L干扰素),采用CCK8法检测各组细胞增殖活性,采用流式细胞仪、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法及Western blot法检测各组Raji细胞的细胞周期、EB病毒(EBV)限制性内切酶I Z左片段1(BZLF1)和EBV限制性内切酶I R左片段1(BRLF1) mRNA表达、Z反式激活因子(ZTA)和R反式激活因子(RTA)蛋白的表达。结果单用组和联用组Raji细胞的增殖均受抑制并呈浓度依赖性(P 0. 05),且联用组被抑制程度较单用组强(P 0. 05);随着达沙替尼浓度增大,单用组和联用组Raji细胞的S期细胞比例减少(P 0. 05)、G2/M期细胞比例增多(P 0. 05),且联用组S期细胞减少、G2/M期细胞增多的程度均较单用组强(P 0. 05);随着达沙替尼浓度增大,单用组和联用组均能上调Raji细胞的BZLF1、BRLF1 mRNA表达(P 0. 05),且联用组上调作用强于单用组(P 0. 05);空白对照组Raji细胞中ZTA和RTA蛋白无表达,单用组和联用组Raji细胞中ZTA和RTA蛋白表达随着达沙替尼浓度的增加而增加(P 0. 05),且联用组蛋白表达的增加程度强于单用组(P 0. 05)。结论达沙替尼能抑制Raji细胞增殖,且与干扰素联用后效果明显增强,其机制可能与达沙替尼联合干扰素上调Raji细胞中BZLF1、BRLF1 mRNA和ZTA、RTA蛋白的表达从而使EB病毒进入裂解期有关。
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